Lymphocyte proliferative responses in dairy cows supplemented with an immunomodulatory feed additive and administered polyvalent vaccination / [Proliferação de linfócitos em vacas leiteiras suplementadas com um aditivo alimentar imunomodulador e vacinadas com vacina polivalente]

O presente estudo avaliou o efeito da suplementação com OmniGen-AF® na proliferação de linfócitos e títulos de anticorpos após vacinação em bovinos leiteiros. Amostras de sangue periférico foram coletadas de 32 vacas leiteiras para quantificação dos títulos de anticorpos anti-Leptospira, e amostras de sangue periférico de 16 vacas leiteiras foram também coletadas para avaliação da proliferação de linfócitos. Observou-se que a suplementação com OmniGen-AF® aumentou a proliferação basal de linfócitos (sem estímulos) 21 dias após a vacinação (P=0,03), apesar de reduzir a proliferação de linfócitos B quando estimulada com Leptospira borgpetersenii serovar Hardjo inativada pelo calor (P=0,03). Ademais, nenhum efeito da suplementação sobre a proliferação de linfócitos no momento imediatamente anterior à vacinação e nos títulos de anticorpos anti-Leptospira foi encontrado. Além disso, a proliferação de linfócitos estimulada com lipopolissacarídeos foi maior em vacas multíparas que em primíparas 21 dias após a vacinação (P=0,03). Desse modo, o presente estudo demonstra que a suplementação com OmniGen-AF® não afetou de forma robusta a proliferação de linfócitos e os títulos de anticorpos anti-Leptospira após vacinação em vacas leiteiras sadias.(AU)

Frequência das doenças de pele não tumorais em cães no município de João Pessoa, Paraíba, Brasil (2014-2016) / [Frequency of non tumor skin diseases in dogs in the city of João Pessoa, Paraíba, Brazil (2014-2016)]

Diante da carência de estudos sobre a frequência de dermatopatias que acometem cães por região geográfica no Brasil, o presente estudo objetivou conhecer a frequência das principais doenças cutâneas que afetam cães na região metropolitana de João Pessoa, Paraíba, Brasil. Os dados foram coletados de cães que passaram por atendimento dermatológico no período de setembro de 2014 a dezembro de 2016. Além dos exames clínicos e dermatológicos os cães foram submetidos a exames complementares (citológico, raspado de pele, parasitológico, tricograma, bacteriológico, micológico, histopatológico e molecular). No período do estudo, foram atendidos 1.083 cães, em que 18,65% (202/1.083) apresentavam algum tipo de dermatopatia não tumoral. Dos 202 cães acometidos, 51,49% (104/202) eram machos e 48,51% (98/202), fêmeas. Desses 202 cães, 13 tinham dois diagnósticos, totalizando 215 dermatopatias. Dos cães afetados, 62,87% (127/202) eram de raça definida e 37,13% (75/202), sem raça definida (SRD). As lesões observadas com mais frequência caracterizaram-se por áreas alopécicas, hipotricoicas, maculosas, erosivas e ulcerativas, placoides, eritematosas, assim como comedões, colaretes, seborreia. As dermatopatias parasitárias foram as mais frequentes (35,35%; 76/215), seguidas pelas dermatopatias bacterianas (24,19%; 52/215), dermatopatias alérgicas (20,00%; 43/215), dermatopatias fúngicas (17,21%; 37/215), dermatopatias por outras causas (2,32%; 5/215) e pelas dermatopatias autoimunes (0,93%; 2/215). Os exames físicos e dermatológicos, incluindo anamnese detalhada, histórico clínico apurado, associado a exames complementares, são ferramentas importantes para o diagnóstico das dermatopatias em cães. Presume-se que a frequência de dermatopatias em cães na região de estudo possa ser maior do que a observada.(AU)

Faced with the lack of studies on the frequency of dermatopathies that affect dogs by geographical region in Brazil, the present study aimed to evaluate the frequency of dermatopathies that affect the canine species in the metropolitan region of João Pessoa, Paraíba, Brazil. Data was collected from dogs that underwent dermatological care from September 2014 to December 2016. In addition to the clinical and dermatological examinations, dogs underwent complementary exams, such as cytological, skin scraping, parasitological skin examination, trichogram, bacteriological, mycological, histopathological and/or polymerase chain reaction. During the study period, 1,083 dogs were examined, in which 18.65% (202 /1,083) had some form of non-tumoral dermatopathy. Of the 202 dogs affected, 51.49% (104/202) were males and 48.51% (98/202) females. Of these 202 dogs, thirteen had two diagnoses, totaling 215 dermatopathies. 62.87% (127/202) of the affected dogs were purebred and 37.13% (75/202) were without a defined breed (WDB). The most frequently observed lesions were alopecia, hypotric, macular, erosive and ulcerative, placoid, erythematous areas, as well as comedones, collaretes and seborrhoea. The parasitic dermatopathies were the most frequent (35.35%; 76/215), followed by bacterial dermatopathies (24,19%; 52/215), allergic dermatopathies (20,00%; 43/215), dermatomycosis (17,21%; 37/215), dermatopathies for other causes (2,32%; 5/215) and autoimmune dermatopathies (0.93%; 2/215). Clinical and dermatological examination, including a detailed anamnesis, accurate clinical history and associated complementary exams are important tools for the diagnosis of dermatopathies in dogs. Available literature present some studies with canine dermatopathies frequencies superior to that obtained in the present study; however, the number of animals examined was smaller. In this survey, it was possible to establish the primary and secondary diagnoses in 100.0% of the non-tumoral dermatopathies in dogs, results higher than in previous studies. Probably, the frequency of canine dermatopathies in this region is higher than that observed, thus requiring additional studies with greater sampling.(AU)

Caracterização anatomopatológica e imuno-histoquímica dos tumores das glândulas cutâneas em cães / Anatomopathological and immunohistochemical characterization of skin gland tumors in dogs

O presente estudo objetivou caracterizar os aspectos anatomopatológicos e imuno-histoquímicos dos tumores das glândulas cutâneas em cães. A caracterização morfológica seguiu a classificação atualizada da Organização Mundial de Saúde. Para a caracterização imuno-histoquímica, utilizaram-se anticorpos monoclonais primários anti-citoqueratina 14 (CK14), vimentina, p63, calponina, EGFR e Ki-67. Dos animais examinados, 66,67% (18/27) eram machos e 33,33% (9/27) fêmeas, 21 tinham raça definida e seis eram sem raça definida (SRD), com idade variando entre sete e 15 anos. Dos tumores caracterizados, 40,74% eram hepatoides (11/27), 29,63% sebáceos (8/27), 25,92% apócrinos (7/27) e 3,70% meibômio (1/27). Os tumores malignos representaram 55,56%, e os benignos 44,44%. Com esses resultados, foi possível demonstrar que os tumores das glândulas cutâneas em cães são frequentes, sem predileção por raça, sexo e com idade superior ou igual a sete anos. Os anticorpos CK 14, p63, vimentina e EGFR foram imunoexpressos nas células basais, células de diferenciação sebácea dos tumores hepatoides e de meibômio e células mioepiteliais. Entretanto, a vimentina e o EGFR não demonstraram imunomarcação para os tumores sebáceos. A calponina foi um bom marcador para as células mioepiteliais. O índice de Ki-67 foi mais acentuado nos tumores malignos em relação aos benignos. No entanto, estudos futuros utilizando maior número de casos se fazem necessários.(AU)

The present study aimed to characterize the anatomopathological and immunohistochemical aspects of cutaneous glandular tumors in dogs. Tumours were diagnosed according to the WHO criteria for canine skin neoplasms. For the immunohistochemical characterization, the primary monoclonal antibodies anti-cytokeratin 14 (CK14), vimentin, p63, calponin, EGFR and Ki-67 were used. Males were 66.67% (18/27) and females 33.33% (9/27), 21 had a defined race and 6 were mixed breed, with ages varying from 7 to 15 years. The tumors characterized were 40.74% hepatoid (11/27), 29.63% sebaceous (8/27), 25.92% apocrine (7/27) and 3.70% Meibômio (1/27). Malignant tumors accounted for 55.56% and benign tumors 44.44%. With these results it was possible to demonstrate that tumors of cutaneous glands in dogs are frequent, with no predilection for race, sex and with an age ≥ seven years. The CK 14 antibodies, p63, vimentin, and EGFR were imunoexpressed in the basal cells of the sebaceous cell differentiation and Meibomian hepatoides tumors and myoepithelial to cells. However, vimentin and EGFR did not demonstrate immunostaining for sebaceous tumors. Calponin was a good marker for myoepithelial cells. The Ki-67 index was more pronounced in malignant tumors compared to benign tumors. However, more studies are needed mainly using a higher number of tumors.(AU)

Estudo da vascularização folicular e do corpo lúteo de éguas cíclicas tratadas com extrato de pituitária equina utilizando ultrassom Doppler colorido / Study of follicular and corpus luteum vascularization in mares treated with Equine Pituitary Extract using ultrasound color Doppler

Informações sobre a vascularização da parede folicular e do corpo lúteo equino, associadas à superovulação, são escassas. Com o objetivo de avaliar o efeito superovulatório do extrato de pituitária equina (EPE) no fluxo sanguíneo folicular e luteal, foram utilizadas seis éguas Puro Sangue Árabe, em dois ciclos estrais (controle e tratamento). As éguas foram monitoradas diariamente por ultrassonografia modo B, até que os folículos atingissem diâmetro de 23mm (desvio). No ciclo tratamento, as éguas receberam 8mg de EPE, uma vez ao dia, por via IM, até que dois ou mais folículos atingissem o diâmetro entre 32 e 35mm. A ovulação foi induzida com acetato de deslorelina, quando os folículos atingiram, no mínimo, 35mm. No momento do desvio folicular, da indução da ovulação e do último exame pré-ovulatório, foi utilizada a ultrassonografia modo B para medir o diâmetro dos folículos e, no oitavo dia pós-ovulação, para a área do corpo lúteo (CL). Utilizou-se também ultrassonografia com Doppler colorido para avaliar a perfusão sanguínea da parede folicular e do parênquima luteal. No ciclo controle, foi realizado o mesmo procedimento, exceto pelo uso do EPE. Os dados foram submetidos à análise de variância, com nível de significância de 5%. Não foi observado efeito do EPE sobre o número de ovulações, o diâmetro dos folículos, a vascularização da parede folicular e a concentração sérica de estrógeno. Os animais, tratados ou não, apresentaram CLs funcionais, não havendo diferença na área do parênquima ou da vascularização luteal, nem na concentração sérica de progesterona, no oitavo dia após a ovulação. Foi observado que o EPE proporcionou um maior número de folículos subordinados no momento da indução da ovulação do folículo dominante (P ≤ 0,05). Embora esses folículos não tenham chegado a ovular, concluiu-se que o EPE atuou no crescimento de folículos, que podem ser utilizados em outras biotécnicas, como a transferência de oócitos, com maior aproveitamento da reserva folicular de ovários equinos.(AU)

Knowledge about follicle and corpus luteum vascularization associated with superovulation in mares is scarce. Aiming to evaluate the effect of equine pituitary extract (EPE) on superovulation, the experiment was conducted using six mares Purebred Arabian in two estrous cycles (control and treatment). The mares were synchronized, and monitored daily by ultrasound B mode until the follicles reached diameter ≤ 23 mm (deviation). In the treatment cycle, from the deviation, mares received 8 mg of EPE, once a day, intramuscularly, until two or more follicles reached a diameter between 32 and 35 mm. Ovulation was induced with deslorelin acetate when follicles reached at least 35 mm. At the time of follicular deviation, induction of ovulation and final preovulatory exam, it was used B-mode ultrasound to measure the diameter of follicles and on the eighth day after ovulation to measure the area of the corpus luteum (CL); color Doppler was also used to assess blood perfusion of the follicle wall and luteal parenchyma. In the control cycle was performed the same procedure except for the use of EPE. Data were subjected to analysis of variance, with 5% significance level. There was no effect of EPE on ovulation number, diameter of follicles, vascularity of the follicular wall and serum estrogen concentration. The animals treated or not, showed functional CLs, with no difference in parenchymal area or luteal vascularization, or in serum progesterone concentration on the eighth day after ovulation. It was observed that the EPE provided a greater number of subordinate follicles at the time of induction of ovulation of the dominant follicle. Although these follicles have failed to ovulate, it was concluded that EPE influenced the follicles growth, and it can be used in other biotechnologies, with greater utilization of equine ovarian follicular reserve.(AU)

Molecular detection of hepatitis E virus in feces and slurry from swine farms, Rio Grande do Sul, Southern Brazil / Detecção molecular do vírus da hepatite E em fezes e chorume de propriedades suinícolas, Rio Grande do Sul, Sul do Brasil

Hepatitis E virus (HEV) is highly disseminated among swine herds worldwide. HEV is also a threat to public health, since particularly genotypes 3 and 4 may cause acute hepatitis in human beings. No previous studies were done on the occurrence of HEV in environmental samples in Rio Grande do Sul, Brazil. In the present study, reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) was employed to detect the presence of HEV in swine feces and in effluents from slurry lagoons in farms located in the municipality of Teutônia, inside the area of swine husbandry in the state. Pooled fecal samples from the floor of pig barns from 9 wean-to-finish farms and liquid manure samples were collected from the slurry lagoons from 8 of these farms. From the pooled fecal samples, 8/9 were positive for the HEV ORF1 gene by RT-PCR; all the slurry lagoon samples were positive for HEV RNA (100%). The identity of the HEV ORF1 amplicons was confirmed by sequencing belonging to HEV genotype 3, which was previously shown to be circulating in South America.

O vírus da hepatite E (HEV) é altamente disseminado entre rebanhos suínos no mundo todo. O HEV é também uma ameaça à saúde pública, já que os genótipos 3 e 4 podem causar hepatite aguda em seres humanos. Não há estudos anteriores sobre a ocorrência de HEV em amostras ambientais no Rio Grande do Sul. No presente estudo, empregou-se transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) para detectar a presença de HEV em fezes de suínos e efluentes de lagoas de chorume em fazendas localizadas no município de Teutônia, representativo da região de maior produção de suínos no estado. Pools de amostras fecais foram coletadas a partir do chão de galpões de suínos provenientes de 9 propriedades de terminação; outra amostra de esterco líquido foi coletada das lagoas de chorume de 8 dessas fazendas. A partir das amostras fecais reunidas, 8/9 foram positivas para o gene ORF1 de HEV por PCR convencional; todas as amostras de lagoas de chorume foram positivas para RNA de HEV (100%). A identificação dos produtos de amplificação de HEV ORF1 foi confirmada por sequenciamento pertencente ao HEV genótipo 3, o qual foi previamente detectado na América do Sul.

Indução, caracterização bioquímica e ultra-estrutural de calos de aroeira-do-sertão (Myracrodruon urundeuva Fr. All. ) / Induction, biochemical and ultrastructural characterization of the callus of "aroeira-do-sertão" (Myracrodruon urundeuva Fr. All. )

A aroeira-do-sertão (Myracrodruon urundeuva Fr. All.) é espécie arbórea que apresenta grande valor econômico devido às propriedades químicas da casca com elevado teor de taninos. Em decorrência da exploração predatória encontra-se inserida na lista oficial de espécies da flora brasileira ameaçadas de extinção na categoria vulnerável. A micropropagação vem sendo colocada como importante forma de multiplicação dessa espécie, na busca de alternativa para a exploração sustentável. Este trabalho foi realizado com o objetivo de induzir calos a partir de segmentos foliares usando 2,4-D e caracterizá-los quanto aos aspectos morfológicos e bioquímicos. Os resultados obtidos indicam que é possível induzir calos a partir de segmentos foliares de aroeira-do-sertão utilizando-se 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Os calos obtidos foram compactos e não-embriogênicos, apresentando valores médios de 43,32 mg g-1 de açúcares solúveis totais; 23,62 mg g-1 de açúcares redutores; 3,157 mg g-1 de proteína total; 3,147 mg g-1 de aminoácidos livres e 0,914 mg g-1 de compostos fenólicos totais na matéria fresca.

"Aroeira-do-sertão" (Myracrodruon urundeuva Fr. All.) is a tree species that has great economic value due to the chemical properties of its bark, which has high tannin content. On account of the predatory exploitation it has been placed in the official list of threatened species of the Brazilian flora, in the vulnerable category. Micropropagation has been considered an important form of multiplication of this species in the search for an alternative for its sustainable exploitation. This study was conducted with the aim of inducing callus from leaf segments using 2,4-D and characterizing them according to their morphological and biochemical aspects. The obtained results indicate that it is possible to induce callus from leaf segments of M. urundeuva using 2,4-dichlorophenoxyacetic (2,4-D). The obtained calluses were compact and non-embryogenic, with average values of 43.32 mg g-1 total soluble sugars, 23.62 mg g-1 reducing sugars, 3.157 mg g-1 total protein, 3.147 mg g-1 free-form amino acids and 0.914 mg g-1 phenolic compounds in the fresh matter.

Dormancy break in seeds of quina (Strychnos pseudoquina A. St.-Hil.) / Superação da dormência de sementes de quina (Strychnos pseudoquina A. St.-Hil.)

"Quina" (Strychnos pseudoquina A. St. Hil) is a medicinal plant species from the Brazilian Cerrado. As its seeds show dormancy, they were subjected to the treatments pre-cooling at 5ºC during 7 days, pre-heating at 40ºC during 7 days, pre-soaking in sulfuric acid PA during 5 and 15 min, pre-soaking in boiling water during 5 and 15 min, pre-soaking in 100 and 200 ppm gibberellic acid during 48 h, pre-soaking in distilled water during 24 and 48 h, and mechanical scarification to break dormancy. Counts were daily conducted from the 2nd day after the experiment implementation until the germination stabilization at the 65th day. The germination speed index (GSI) and the germination percentage were evaluated. Germination rates above 96 percent were reached in seeds pre-soaked in water during 48 h and substrate moistened with water or KNO3.

A quina (Strychnos pseudoquina A. St.-Hil) é espécie medicinal do Cerrado Brasileiro. As sementes apresentam dormência e, por isso, foram submetidas aos tratamentos pré-resfriamento a 5ºC durante 7 dias, pré-aquecimento a 40ºC durante 7 dias, pré-embebição em ácido sulfúrico P.A. durante 5 e 15 minutos, pré-embebição em água fervente durante 5 e 15 minutos, pré-embebição em ácido giberélico a 100 e 200 ppm, durante 48 horas, pré-embebição em água destilada durante 24 e 48 horas e escarificação mecânica, visando à superação da dormência. Foram realizadas contagens diárias entre o 2º dia após a implantação do experimento até a estabilização da germinação, que ocorreu no 65º dia. Foram avaliados o índice de velocidade de germinação (IVG) e a porcentagem de germinação. Taxas de germinação acima de 96 por cento foram atingidas em sementes pré-embebidas em água durante 48 horas e substrato umedecido com água ou KNO3.

Molecular techniques for the study and diagnosis of parasite infection

In parasitology, routine laboratory diagnosis involves conventional methods, such as optical microscopy, used for the morphological identification of parasites. Currently, molecular biology techniques are increasingly used to diagnose parasite structures in order to enhance the identification and characterization of parasites. The objective of the present study was to review the main current and new diagnostic techniques for confirmation of parasite infections, namely: polymerase chain reaction (PCR), real-time polymerase chain reaction (RT-PCR), loop-mediated isothermal amplification (LAMP), Luminex xMAP, random amplified polymorphic DNA (RAPD), amplified fragment length polymorphism (AFLP), and restriction fragment length polymorphism (RFLP), in addition to microsatellites. Molecular assays have comprehensively assisted in the diagnosis, treatment and epidemiological studies of parasitic diseases that affect people worldwide, helping to control parasitic disease mortality.

Efeito da frequência de amamentação sobre a taxa de ovulação após tratamento com desmame temporário + GnRH, sobre a incidência de luteólise prematura no primeiro ciclo estral pós-parto e sobre o desempenho da progênie de vacas Nelore / Effect of suckling frequency on ovulation rate after temporary weaning + GnRH treatment, incidence of premature luteolysis in the first postpartum estrous cycle, and performance of calves from Nelore cows

Avaliou-se o efeito da restrição na frequência de amamentação sobre o diâmetro folicular no dia 0 (DFOL), sobre a taxa de ovulação (TO), e sobre a incidência de luteólise prematura no primeiro ciclo estral pós-parto (ILP) de vacas Nelore multíparas, em anestro, submetidas à amamentação ad libitum (controle; n= 115) ou amamentação uma vez ao dia (restrito; n= 109), entre os dias -14 e 9 do experimento, e estudou-se o efeito desses tratamentos sobre o peso à desmama da progênie dessas vacas. Induziu-se ovulação com remoção de bezerros entre os dias -2 e 0 e aplicação de 100μg de GnRH no dia 0. Somente animais que ovularam foram mantidos no experimento (n= 125). A ocorrência de luteólise prematura foi avaliada por meio da dosagem da concentração sérica de progesterona nos dias 5 e 9. A TO não foi influenciada pelos tratamentos (55,8 por cento; P>0,1), e as vacas do tratamento restrito apresentaram maior DFOL (10,90±0,26 vs. 10,18±0,21mm; P<0,05) e menor ILP (21,4 por cento vs. 43,5 por cento; P<0,05). Os bezerros do tratamento controle foram mais pesados (162,32±2,08 vs. 155,91±4,12kg; P<0,05). Conclui-se que a restrição na frequência de amamentação em vacas Nelore reduz a ILP, porém com possível efeito negativo no desenvolvimento dos bezerros.

The effects of restricted suckling on follicular diameter at day 0 (FDDO), ovulation rate (OR), and incidence of premature luteolysis in the first post partum estrous cycle (PLI) of Nelore cows and the effects on weight at weaning (WW) of progenie of these cows were evaluated. Multiparous anestrous postpartum Nelore cows were submitted to ad libitum suckling (control; n= 115) or once-a-day suckling (restricted; n= 109) from days -14 to 9 of the experiment. For both treatments, a temporary calf removal was performed from days -2 to 0, and on day 0 cows received 100μg of GnRH. Only animals that ovulated after GnRH treatment were used in the experiment (n= 125). The occurrence of premature luteolysis was evaluated by dosage of serum progesterone concentrations on days 5th and 9th. The OR was not affected by treatments (55.8 percent; P>0.1), but cows from restricted treatment had larger FDDO at time of GnRH treatment (10.90±0.26 vs. 10.18±0.21mm; P<0.05) and lower PLI (21.4 percent vs. 43.5 percent; P<0.05) than cows from control treatment. Calves from control treatment had higher WW than calves from restricted treatment (162.32±2.08 vs. 155.91±4.12kg; P<0.05). These results indicate that the restriction in frequency of suckling in Nelore cows may decrease the incidence of premature luteolysis in the first postpartum estrous cycle; however, with possible negative effects on calves development.

Serum progesterone concentration and conception rate of beef cows supplemented with ground corn after a fixed-time artificial insemination protocol / Concentração sérica de progesterona e taxa de concepção em vacas de corte suplementadas com milho moído após inseminação artificial em tempo fixo

The effects of different levels of finely ground corn (FC) supplementation to grazing beef cows after fixed-time AI (TAI) on serum progesterone (P4) concentrations on day 7 and conception rates on day 28 after TAI were investigated. Three hundred and sixty-four lactating multiparous Brangus cows had follicular and luteal activity synchronized by treatment with estradiol benzoate (Estrogin; 2.0mg IM) and insertion of intra-vaginal P4 releasing device (CIDR) on day -11, followed by treatment with PGF2α (Lutalyse; 25mg IM) on day -4, CIDR and calf removal on day -2, and treatment with GnRH (Fertagyl; 100µg IM) TAI and calf return on day 0. On day 0, cows were randomly allotted in one of the following FC supplement treatments: G1 - 2kg/day from day 0 to 21; G2 - 2kg/day from day 0 to 7, and 6kg/day from day 8 to 21; G3 -6kg/day from day 0 to 7, and 2kg/day from day 8 to 21; and G4 -6kg/day from day 0 to 21. Blood samples were collected on day 7, and pregnancy was determined by ultrasonography indicating the presence of a fetus on day 28. Cows supplemented with 2kg/d of FC had higher serum concentration of P4 on day 7 than cows supplemented with 6kg/d (1.58 vs. 1.28ng/mL; P<0.01; SEM = 0.08). Cows from G4 had higher conception rates compared to G1 cows (58.4 vs. 41.9 percent, respectively; P<0.05). The level of supplemental energy intake after TAI is negatively associated with following serum P4 concentrations, but positively associated with conception rates of grazing beef cows.

Avaliaram-se os efeitos de diferentes níveis de ingestão de suplemento com milho moído finamente (MF) em vacas de corte, mantidas em pasto, após inseminação artificial em tempo fixo (IATF), sobre a concentração sérica de progesterona (P4) no dia 7, e sobre a concepção no dia 28 pós IATF. Trezentas e sessenta e quatro vacas Brangus, multíparas lactantes, tiveram as atividades folicular e luteal sincronizadas por tratamento com benzoato de estradiol (Estrogin; 2,0mg IM) e inserção de dispositivo intravaginal de P4 (CIDR) no dia -11, seguido por tratamento com PGF2 α (Lutalyse; 25mg IM) no dia - 4, retirada do CIDR e remoção temporária de bezerros no dia -2, e tratamento com GnRH (Fertagyl; 100 µ g IM), IATF e retorno dos bezerros no dia 0. No dia 0, as vacas foram aleatoriamente distribuídas para receber um dos quatro tratamentos: G1 -2kg/dia de MF do dia 0 ao dia 21; G2 -2kg/dia de MF do dia 0 ao dia 7, e 6kg/dia de MF do dia 8 ao dia 21; G3 -6kg/dia de MF do dia 0 ao dia 7, e 2kg/dia de MF do dia 8 ao dia 21; G4 -6kg/dia de MF do dia 0 ao dia 21. Amostras de sangue foram colhidas no dia 7, e o diagnóstico de gestação foi realizado por ultrassonografia no dia 28. As vacas suplementadas com 2kg/dia de MF apresentaram maior concentração sérica de P4 no dia 7 em relação às vacas suplementadas com 6kg/dia (1,58 vs. 1,28ng/mL; P<0,01, EPM=0,08). As vacas do G4 apresentaram maior taxa de concepção em relação às vacas do G1 (58,4 vs. 41,9 por cento, respectivamente; P<0,05). O nível de consumo do suplemento energético após a IATF é negativamente associado às concentrações séricas de P4, porém positivamente associado à taxa de concepção em vacas de corte em pasto.

Cisto ovariano em vacas de leite: incidência, resposta à aplicação de GnRH e desempenho reprodutivo / Ovarian cysts in lactating dairy cows: incidence, response to GnRH, and reproductive performance

A incidência de cistos ovarianos, a resposta ao tratamento com GnRH e os efeitos da ocorrência de cisto no desempenho reprodutivo e na taxa de descarte foram determinados em vacas lactantes da raça Holandesa. Vacas lactantes (n=333) foram avaliadas semanalmente por ultrassonografia a partir da quarta semana pós-parto, visando à detecção de corpos lúteos (CL) e de folículos ovarianos maiores que 10mm. Na sétima semana pós-parto, as vacas foram classificadas: em ciclando (n=248; presença de CL em um dos exames ultrassonográficos); em anestro (n=54; ausência de CL e de folículos >25mm) e com cisto (n=31; ausência de CL e presença de estruturas >25mm), quando foram distribuídas em: grupo-controle (n=16; sem tratamento) e grupo-tratamento (n=15; vacas que receberam uma aplicação de GnRH). A taxa de cura foi de 60,0 por cento no grupo das vacas tratadas e de 87,5 por cento no grupo-controle. As vacas com cistos apresentaram maior intervalo parto-primeira inseminação artificial (P<0,05; 91,4±8,3 vs. 77,8±2,5), maior número de serviços por concepção (P<0,05; 4,4±1,2 vs. 3,6±1,5), maior intervalo parto-concepção (P<0,05; 214,8±25,9 vs. 174,9±7,7) e maior taxa de descarte (P<0,05; 41,2 vs. 21,8 por cento) do que as vacas ciclando. Vacas diagnosticadas com cisto na sétima semana pós-parto apresentaram recuperação espontânea, embora o intervalo parto-concepção e a taxa de descarte tenham sido maiores para essas vacas.

The incidence of ovarian cysts, response to GnRH treatment, and effects on reproductive performance and culling rate of Holstein cows were determined. Ovaries of lactating cows (n=333), were weekly monitored by ultrasound, beginning at fourth week postpartum, to determine the presence of corpus luteum (CL) and follicles greater than 10mm. In the seventh week the cows were classified as cycling (n=248; presence of corpus luteum (CL) in one of the ultrasound evaluations); anovulatory (n=54; absence of CL and follicles less than 25mm), and cystic (n=31; absence of CL and presence of structures greater than 25mm). The cysts cows were distributed in two groups in the seventh week: control group (n=16; without treatment) and treatment group (n=15; cows received one GnRH injection). The recovery rate was 60.0 percent in treated cows and 87.5 percent in control cows. The cystic cows had longer average interval from parturition to first AI (P<0.05; 91.4±8.3 vs. 77.8±2.5), higher number of services per conception (P<0.05; 4.4±1.2 vs. 3.6±1.5), longer interval parturition to conception (P<0.05; 214.8± 25.9 vs. 174.9±7.7), and higher percentage of culled cows (P<0.05; 41.2 percent vs. 21.8 percent), than cycling cows. Cystic cows without treatment had the same recovery rate as cows treated with GnRH. Cystic cows had longer intervals from parturition to conception, and higher culling rate.

Remoção temporária de bezerros em dois momentos do protocolo de sincronização da ovulação GnRH-PGF2alpha-BE em vacas Nelore pós-parto / Temporary weaning of calves at two different times of the GnRH-PGF2alpha-EB synchronization protocol for ovulation in post-partum Nelore cows

Os efeitos da remoção temporária de bezerros (RB) sobre características foliculares e taxas de ovulação e de prenhez de vacas Nelore foram avaliados em dois experimentos quando da inseminação artificial em tempo fixo (IATF), utilizando-se um protocolo à base de GnRH-PGF2α-BE. No experimento 1, 139 vacas Nelore, lactantes, cíclicas ou acíclicas, receberam um protocolo hormonal envolvendo a aplicação de 100±g de análogo GnRH no dia zero (D0-GnRH), 25mg de PGF2α no dia 7 (D7-PGF2α) e 1,0mg de benzoato de estradiol no dia 8 (D8-BE). Os animais foram aleatoriamente distribuídos para serem submetidas ou não à RB (48 horas) antes da aplicação de GnRH (RB1) ou após a aplicação de PGF2α (RB2). Avaliaram-se o diâmetro folicular (DF) nos dias 0 (D0) e 9 (D9) do protocolo e as taxas de ovulação (T0), advindas dos tratamentos. As vacas acíclicas que receberam RB1 apresentaram maiores DF no D0 (P<0,05) e taxa de ovulação (P<0,05) quando da aplicação de GnRH, em relação às que não receberam RB1. Nas vacas cíclicas, não houve efeito da RB1 sobre as variáveis analisadas. As vacas que receberam RB2 apresentaram maiores DF no D9 (P<0,05) e taxa de ovulação (P<0,01) quando da aplicação de BE, em relação às que não receberam a RB2. No experimento 2, 376 vacas da raça Nelore, lactantes, foram submetidas ao mesmo protocolo hormonal e aos mesmos tratamentos do experimento 1, mas foram inseminadas 24 a 30 horas após a aplicação de BE no D8, visando avaliar a taxa de prenhez após a IATF. A taxa de prenhez foi maior nos animais que receberam as duas RB em relação às que não receberam RB (29,8 por cento vs 10,6 por cento; P<0,05). A remoção de bezerros associada ao protocolo hormonal aplicado pode ter aumentado as taxas de prenhez devido às maiores taxas de ovulação, em resposta ao GnRH ou ao benzoato de estradiol.

The effects of temporary weaning (TW) on follicular characteristics and ovulation and pregnancy rates were evaluated in Nelore cows submitted to a fixed-time artificial insemination (TAI) protocol using GnRH-PGF2α-EB. In Experiment 1, 139 cycling or non-cycling suckling Nelore cows received a hormonal protocol based on administration of 100±g of GnRH analog on day zero (D0-GnRH), 25mg of PGF2α on day seven (D7-PGF2α) and 1.0mg of estradiol benzoate on day eight (D8-BE). Cows were randomly assigned to receive or not TW (48 hours) before GnRH (TW1) or after PGF2α (TW2). Follicular diameter (FD) on days zero (D0) and nine (D9) of the protocol and ovulation rates were evaluated. Noncycling cows that received TW1 had larger FD on D0 (P<0.05) and higher ovulation rate after GnRH treatment (P<0.05) than cows without TW1. No effects of TW1 on analyzed variables of cycling cows were observed. TW2 cows had larger FD on D9 (P<0.05) and higher ovulation rate after EB treatment (P<0.01) than cows without TW2. In Experiment 2, 376 suckling Nelore cows were submitted to the same protocols and treatments described in Experiment 1, and artificial insemination was performed from 24 to 30 hours after EB on D8, aiming to evaluate the pregnancy rate after fixed-time artificial insemination. The pregnancy rate was higher in cows submitted to both TW (1 and 2) than in cows without TW (29.8 percent vs 10.6 percent; P<0.05). Temporary weaning associated to the applied protocol may have improved pregnancy rates due to greater ovulation rates after GnRH or EB treatments.

Eficácia da dose reduzida de gonadorelina e diferentes prostaglandinas no protocolo ovsynch em vacas holandesas / Efficacy of decreasing dose of gonadorelin and comparison between different prostaglandins on ovsynch protocol in lactating Holstein cows

Avaliou-se a eficácia da dose de 0,10 ou de 0,25mg de gonadorelina nas taxas de ovulação e de sincronização no protocolo Ovsynch e de 150mcg de D-cloprostenol ou 0,530mg de cloprostenol sódico na regressão do corpo lúteo (CL) de sete dias e de todos os CL. Foram utilizadas 136 vacas lactantes da raça Holandesa, com média de produção de leite de 23,75,8kg/dia, com 138,4±72,0 dias em lactação. As vacas foram distribuídas aleatoriamente em quatro grupos, de acordo com a dose de gonadorelina e o tipo da prostaglandina. As taxas de ovulação e de sincronização foram de 52,9 por cento e 80,9 por cento para 0,10mg de gonadorelina e de 57,4 por cento e 80,9 por cento para 0,25mg de gonadorelina, respectivamente. A taxa de regressão do CL de sete dias foi de 97,1 por cento para o D-cloprostenol e de 97,5 por cento para o cloprostenol sódico. A taxa de prenhez não foi influenciada pelos tratamentos, mas foi influenciada pela taxa de ovulação à primeira aplicação de gonadorelina, 16,0 por cento vs. 6,6 por cento para as vacas que ovularam e não ovularam, respectivamente. Conclui-se que 0,10mg de gonadorelina foi eficiente e ambas prostaglandinas podem ser usadas em protocolos de sincronização da ovulação.

The efficacy of 150mcg D-cloprostenol or 0.530mg cloprostenol sodium on the 7- day corpus luteum (CL) regression rate, and of two doses of gonadorelin, 0.10mg vs. 0.25mg, on the ovulation and synchronization rates during the Ovsynch protocol were evaluated. Lactating Holstein cows (n=136), producing 23.75.8kg milk/d and 138.4±72.0 days in milk were randomly assigned to four groups, according to dose of gonadorelin and prostaglandin type. No effect of the products and doses tested on conception rate were observed. The ovulation and synchronization rates using 0.10mg or 0.25mg of gonadorelin were 52.9 percent and 80.9 percent vs. 57.4 percent and 80.9 percent, respectively. The CL regression rates in cows ovulating after the first GnRH using D-cloprostenol or cloprostenol sodium were 97.1 percent and 97.5 percent, respectively. The pregnancy rate was not affected by treatment, but by ovulation rate after the first injection of GnRH. The pregnancy rates were 16.0 percent and 6.6 percent for ovulated and non ovulated cows, respectively. The results suggest that 0.10mg dose of gonadorelin was efficient and both prostaglandins can be used in synchronization of ovulation protocols.

Mês de parição, condição corporal e resposta ao protocolo de inseminação artificial em tempo fixo em vacas de corte primíparas / Calving date, body condition score, and response to a timed artificial insemination protocol in first-calving beef cows

No experimento I, foi avaliada a alteração da condição corporal (CC) pré e pós-parto em 155 novilhas inseminadas para parir de setembro a dezembro. A CC foi avaliada mensalmente no pré e pós-parto, de junho a fevereiro. No experimento II, 538 vacas primíparas foram sincronizadas com o protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) que usou estradiol junto ao dispositivo intravaginal de progesterona (CIDR®). As taxas de ciclicidade, sincronização e concepção foram avaliadas por ultra-som. No experimento I, os animais que pariram primeiro tiveram maior (P<0,001) redução na CC pós-parto. No experimento II, foi observado maior CC (P<0,0001) nos animais com menor número de dias pós-parto, maior (P<0,05) taxa de sincronização nas vacas de melhor CC e aumento (P<0,0001) na taxa de concepção proporcional ao aumento na CC (incremento médio na concepção de seis pontos percentuais para cada 0,25 ponto na CC). Não se deve antecipar a parição de novilhas de corte quando se pretende realizar IATF no início da estação de monta subseqüente.

In experiment I, it was evaluated the body condition score (BCS) change during pre and post-partum in 155 heifers, inseminated to calve from September to December. The BCS was monthly evaluated from June to February, during the pre and post-partum periods. In experiment II, 538 primiparous cows were synchronized with a timed artificial insemination (TAI) protocol which used estradiol associated with an intravaginal progesterone device (CIDR®). The cyclicity, synchronization, and conception rates were evaluated by ultrasound. In experiment I, the animals that calved earlier had higher (P<0.001) reduction on BCS. In experiment II, it was observed higher BCS (P<0.0001) in cows with lower days in post-partum, higher (P<0.05) synchronization rate in cows with a better BCS, and also an increase (P<0.0001) in conception rate as BCS got better (increase in six percentual points in conception for each increase of 0.25 in BCS). Beef heifers should not calve earlier when is planned to submitt these animals to TAI at the beginning of the next breeding season.

Conception rate in Holstein cows treated with GnRH or hCG on the fifth day post artificial insemination during summer / Taxa de concepção de vacas Holandesas tratadas com GnRH ou hCG no quinto dia após a inseminação artificial no verão

Lactating Holstein cows (n=158), at 213±112 days in milking and averaging 26±9kg of milk per day, were randomly assigned to one of three treatment groups: control (CG, n=52, saline), GnRH (GG, n=55, 100g gonadorelin), and hCG (HG, n=51, 2500IU) given five days after artificial insemination (AI). Rectal temperature was taken at the moment of AI and blood samples were collected five, seven, and 12 days after AI. Pregnancy was determined between 42 and 49 days after AI. Concentration of progesterone (P4) in serum (ng/ml, mean±SE) for CG, GG, and HG were, respectively, 2.7±0.4, 2.5±0.4, and 3.2±0.5 on day 5; 4.8±0.4, 4.2±0.4, and 5.7±0.5 on day 7; and 5.2±0.4, 6.9±0.4, and 8.5±0.5 on day 12 after AI. P4 concentration had proportional increase in serum between days 5 and 7 after AI (CG: 178 percent, GG: 168 percent, and HG: 178 percent), suggesting that the treatments did not induce a luteotropic effect on the existing corpus luteum (CL). Concentrations of P4 increased between days 7 and 12 in cows treated with GnRH and hCG (GG: 164 percent, and HG: 149 percent, P<0.01); but not in control cows (GC: 18 percent, P=0.31), suggesting that a new CL was formed. Treatments with GnRH or hCG increased conception rates in cows with rectal temperature below 39.7ºC (CG: 10.1 percent, n=26, GG: 36.8 percent, n=27; and HG: 32.8 percent, n=21), but not in cows with rectal temperature above 39.7ºC (CG: 15.2 percent, n=26; GG: 17.8 percent, n=28; and HG: 24.4 percent, n=30). These data suggest that high body temperature masked the positive impact of treatment with GnRH or hCG on day 5 after AI on conception.

Vacas da raça Holandesas em lactação (n=158) aos 213±112 dias de lactação e produção de 26±9kg leite/dia, foram aleatoriamente distribuídas em três grupos: controle (GC, n=52, salina); GnRH (GG, n=55, 100mcg de gonadorelina); e hCG (GH, n=51, 2500UI de hCG) aplicado no dia 5 após a inseminação artificial (IA). A temperatura retal foi verificada no momento da IA, e as amostras de sangue coletadas nos dias 5, 7 e 12 após a IA. A concepção foi determinada entre os dias 42 e 49 após IA. As concentrações séricas de progesterona (P4 - ng/ml, média±EPM) para GC, GG, e GH foram, respectivamente: no dia 5: 2,7±0,4, 2,5±0,4 e 3,2±0,4; no dia 7: 4,8±0,4, 4,2±0,4 e 5,7±0,5; e no dia 12 após a IA: 5,2±0,4, 6,9±0,4 e 8,5±0,5. O aumento proporcional na concentração sérica de P4 entre os dias 5 e 7 após IA (GC: 178 por cento, GG: 168 por cento, e GH: 178 por cento) sugere que os tratamentos não induziram efeito luteotrópico no corpo lúteo (CL) existente. O aumento na P4 sérica entre os dias 7 e 12 nos animais tratados com GnRH ou hCG (GG: 164 por cento e GH: 149 por cento, P<0,01) em relação aos animais controle (GC: 18 por cento, P=0,31), sugere a indução de novo CL. Os tratamentos com GnRH ou hCG aumentaram as taxas de concepção nas vacas com temperatura retal abaixo de 39,7ºC (GC: 10,1 por cento, n=26; GG: 36,8 por cento, n=27 e GH: 32,8 por cento, n=21), mas não em vacas com temperatura retal acima de 39,7ºC (15,2 por cento n=26; 17,8 por cento, n=28 e 24,4 por cento, n=30). Os resultados sugerem que a alta temperatura corporal pode mascarar os efeitos positivos do tratamento com GnRH ou hCG no dia 5 após a IA, na concepção.

Efeito do intervalo entre recrutamentos foliculares na superovulação de vacas da raça Holandesa não-lactantes / Effect of interval between follicular recruitments on superovulatory response in non-lactanting Holstein cows

Vacas da raça Holandesa não-lactantes, distribuídas em dois grupos, foram sincronizadas com o protocolo Ovsynch modificado. No dia sete (dia 0 = dia do segundo GnRH), o grupo 7 (G-7; n=19) recebeu CIDR usado previamente por cinco dias e 100mcg de GnRH, e o grupo 14 (G-14; n=21), CIDR e 25mg de PGF2alfa. No dia 14 foi aspirado o folículo dominante (FD), trocado o CIDR usado por um novo e foram aplicados 25mg de PGF2alfa. Iniciou-se o tratamento com FSH 36h depois, removeu-se o CIDR com o sétimo FSH e aplicou-se GnRH 36h depois. As inseminações foram feitas 12 e 24h depois. Recuperaram-se os embriões sete dias depois da inseminação artificial. O diâmetro do FD no G-7 foi 13,1±0,57mm no dia sete e 11,2±0,57mm no dia 14. O diâmetro FD persistente no G-14 aumentou de 12,6±0,55mm no dia sete para 16,4±0,55mm no dia 14 (P<0,001). O número de folículos >8mm, 48h após o início do tratamento com FSH, foi maior (P<0,05) no G-7 (15,6±0,05) que no G-14 (12,5±0,05). Não foi detectado efeito de tratamento sobre o número de corpos lúteos e de embriões. O menor intervalo entre recrutamentos foliculares aumentou o número de folículos recrutados, porém não alterou a quantidade e a qualidade dos embriões produzidos

Dry Holstein cows were synchronized by a modified Ovsynch protocol. On day 7 (day 0 = day of the second GnRH), group 7 (G-7; n=19) received an used CIDR and GnRH (100'g). Group 14 (G-14; n=21) received an used CIDR and PGF2alpha (25mg). On day 14, the dominant follicle (DF) was removed, by aspiration; the used CIDR was changed for a new CIDR plus PGF2alpha. Thirty-six hours later, the FSH treatment was initiated. On the seventh injection of FSH, the CIDR was removed. Thirty-six hours after, the cows received GnRH. Donors were inseminated 12 and 24h after the GnRH injection. Embryos were recovered seven days after AI. The DF diameter in G-7 was 13.1mm on day 7 and 11.2mm on day 14. The persistent DF in the G-14 increased from 12.6mm on day 7 to 16.4mm on day 14 (P<0.001). The number of follicles >8mm, 48h after the beginning of the FSH treatment, was 15.6 in G-7 and 12.5 in G-14 (P<0.05). No treatment effects were detected on number of corpus luteum and embryos. The shorter interval between follicular recruitment the higher the number of recruited follicles, but it did not have effects on the number or quality of embryos produced

Ingestão de concentrado e concentração plasmática de progesterona em vacas da raça Holandesa / Concentrate intake and plasmatic progesterone concentration in Holstein cows

Vacas da raça Holandesa não-lactantes (n=7), que receberam 4kg/dia de concentrado durante 28 dias e pasto ad libitum, foram sincronizadas com protocolo Ovsynch. No dia 0 (segunda aplicação de GnRH), as vacas foram distribuídas em dois grupos: as do grupo 2kg receberam 2kg/dia, e as do grupo 8kg receberam 8kg/dia de concentrado, oferecido duas vezes/dia. Os animais foram sincronizados novamente na fase 2. Aqueles que receberam 2kg de concentrado na primeira fase passaram a receber 8kg na segunda fase e vice-versa. As estruturas ovarianas foram avaliadas diariamente por ultra-sonografia. Amostras de sangue para dosagem de progesterona (P4), por radioimunoensaio, foram colhidas diariamente, antes do fornecimento do concentrado e quatro horas depois, até o dia 16 do ciclo estral. Não houve diferença entre os grupos quanto ao diâmetro do folículo ovulatório no dia 0 e ao diâmetro do maior folículo no dia 16. O diâmetro do corpo lúteo foi maior (P<0,05) no dia 16 nos animais do grupo 8kg. Observou-se interação (P<0,05) da quantidade de concentrado fornecida versus dia da colheita das amostras quanto à concentração plasmática de P4. A concentração plasmática de P4, imediatamente antes do fornecimento do concentrado e quatro horas depois, foi menor no grupo 8kg, após o dia 9 do ciclo estral.

Non-lactating Holstein cows (n=7) fed 4kg/day of concentrate for 28 days and kept on pasture were synchronized by Ovsynch protocol. On day 0 (day of 2nd GnRH injection), the cows were distributed in two groups: Group2 = 2kg/day and Group8 = 8kg/day of concentrate, fed twice a day. One replicate was performed (phase 1 and 2). Animals were synchronized again at the beginning of phase-2 and those that fed 2kg of concentrate on phase-1, fed 8kg on phase-2 and vice-versa. The ovarian structures were daily evaluated by ultrasound. Blood samples for progesterone (P4)dosage by RIA were collected daily, just before feeding the concentrate and 4 hours afterwards, until day 16 of the estrous cycle. No difference was detected between the groups in ovulatory follicle diameter on day 0 and in diameter of the largest follicle on day 16. The CL diameter was higher (P<0.05) in Group 8 on day 16 of the estrous cycle. There was an interaction (P<0.05) between the amount of concentrate intake and the day of blood sampling regarding P4 plasma concentration. Cows from Group 8 showed lower P4 plasma concentration, just before feed intake and four hours afterwards, after day 9 of the estrous cycle.